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共聚焦顯微鏡

時間:2012-09-08 10:19來源:廈門眼科中心編輯:xmeye瀏覽:

【文章導讀】共聚焦顯微鏡【5F】:共聚焦顯微鏡是一種利用逐點照明和空間針孔調(diào)制來去除樣品非焦點平面的散射光的光學成像手段,相比于傳統(tǒng)成像方法可以提高光學分辨率和視覺對比度。 基本

  共聚焦顯微鏡【5F】:共聚焦顯微鏡是一種利用逐點照明和空間針孔調(diào)制來去除樣品非焦點平面的散射光的光學成像手段,相比于傳統(tǒng)成像方法可以提高光學分辨率和視覺對比度。

  基本原理

  從一個點光源發(fā)射的探測光通過透鏡聚焦到被觀測物體上,如果物體恰在焦點上,那么反射光通過原透鏡應當匯聚回到光源,這就是所謂的共聚焦,簡稱共焦。共焦顯微鏡在反射光的光路上加上了一塊半反半透鏡(dichroic mirror),將已經(jīng)通過透鏡的反射光折向其它方向,在其焦點上有一個帶有針孔(Pinhole),小孔就位于焦點處,擋板后面是一個光電倍增管(photomultiplier tube,PMT)。可以想像,探測光焦點前后的反射光通過這一套共焦系統(tǒng),必不能聚焦到小孔上,會被擋板擋住。于是光度計測量的就是焦點處的反射光強度。其意義是:通過移動透鏡系統(tǒng)可以對一個半透明的物體進行三維掃描。這樣的構(gòu)想,是在1953年, 美國學者馬文·明斯基提出,經(jīng)過了30年的發(fā)展,才利用激光為光源,發(fā)展出符合馬文·明斯基理想的共聚焦顯微鏡。

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